空氣（qì）淨化係統驗證--潔淨度的測定

驗證通常是由（yóu）安裝確認（IQ）、運行確認（OQ）、性能（néng）確認（PQ）組成的。其中儀器儀表的校準可以歸屬於安裝確認，也可以單獨成為一個組成部分，性能確認是做後的（de）判斷。在生產或工藝驗證中，性能確認（rèn）是檢驗該工藝過程的結果（guǒ）；在生產環境驗（yàn）證中，性能確認是對空（kōng）氣淨化係統是否能達到規定的潔淨度做出判斷，即合格還是不合格，因此性能確（què）認也就是常規意義上或狹義上的“驗證”，也（yě）就是說，平時所做的不包括安裝確認及運行確認的驗證實際上就是（shì）“性能確認”。在空氣淨化係統驗證中，為了不引起誤（wù）解，將性能確認稱為“潔淨度測定”。醫藥工業潔淨室的潔淨度包括懸（xuán）浮（fú）粒子和微生（shēng）物兩個方麵，因此潔淨度的測定主要進行懸浮粒子和微生物的測定。
1、懸浮粒子測定
懸浮粒子的（de）測定可參見國家標準GB/T 16292--2010《醫藥工業潔淨室（區）懸浮粒（lì）子的測（cè）試方法（fǎ）》（以下簡（jiǎn）稱《粒子測試方法》），要（yào）點歸納如下：
（1）懸（xuán）浮粒子的測定方法（fǎ）
主要有顯微鏡法及自動粒子計數法。
①顯微鏡法。顯微鏡（jìng）法是用抽氣泵抽取潔淨室內的空氣，把在測定用的濾膜表麵上捕（bǔ）集到的粒徑中（zhōng）大於（yú）5um的粒子用顯微鏡計數的方（fāng）法。用顯微鏡法測定（dìng）的直徑為（wéi）粒子的（de）大直徑。
②自動粒子計數法。自動粒子計數法是（shì）把潔淨室中粒徑大於0.5um的粒子，按懸浮狀態連續計數的方法。在自動粒子計數法中（zhōng）規定懸浮粒子的粒徑等於標準粒（lì）子光散（sàn）射量的球的相當直徑。自動粒子計數器為了保持其特（tè）性（xìng），需定期用聚苯乙烯膠乳進行脈衝校準及流量校準。
（2）懸浮粒子潔淨度（dù）監測
懸浮（fú）粒子潔淨度監測的采樣點（diǎn）數目及其布置應根據產品的生（shēng）產及（jí）工藝（yì）關鍵操作區設置。一般對於高（gāo）效過濾器（qì）裝在末（mò）端的空氣淨化（huà）係統及層流（liú）罩，隻需在工作區（離地0.7～1m處）設（shè）置測點即可；而高效過濾器裝在空調器內及末端為亞高效過濾器（效（xiào）率≥95%）的空氣淨化係（xì）統，除在工作區設置測點外，還需在每（měi）個（gè）送風口處（離（lí）開風口約0.3m）設置一（yī）個測點。
懸浮（fú）粒子潔淨度測（cè）定（dìng）的小采樣量和少采（cǎi）樣點數目參（cān）見《粒子測（cè）試方法》的規定（dìng）。
（3）懸浮粒子潔淨度級別的（de）結果判定
結果評定參（cān）見《粒子測試方法》規定（dìng）的兩個條件。需要說明的是，《粒子測試方法》的標準未說明是日常監測還是驗證。一般來說，驗證要求應嚴一些（xiē），它是根據動、靜比來確定合（hé）格標準的。測試（shì）狀態有靜態和（hé）動態（tài）測（cè）試兩種。
①靜態測試是在潔淨室（或潔淨（jìng）區）空氣淨化係統已處於正常運行狀態，工藝設備已安裝，在潔淨室（或潔淨區）內沒有生產人員的情況下進行測試。
②動態測試是在潔淨室（或潔淨區）已（yǐ）處於正常生產狀態下進行測試。
2、微生物測（cè）定
微生物測定的目的是確定浮遊的生物微粒（lì）濃度和生物微粒沉降密（mì）度，以此來判斷潔淨室是否達到規定的（de）潔淨度。因此微生物（wù）測定有測定浮遊菌和測定沉降菌（jun1）兩種方法。
細菌通（tōng）常肉眼（yǎn）看不（bú）見，可將它們采集或沉降到培養基中培養。細菌培（péi）養時，由一個或幾個細菌（jun1）繁殖而成的（de）一細菌團稱為菌落（luò）形成單元數（CFU），也稱菌（jun1）落數。浮遊菌用計數濃度表示（CFU/L或CFU/m3），沉降菌用沉降濃度表示［（CFU/（皿.min）］。
浮遊菌與沉降菌的關（guān）係（xì）存在（zài）著（zhe）以（yǐ）下近似公式：
Ng=NV_sFT
式中，Ng是在F麵積上的（de）細菌沉降數，CFU
    N是在空氣中的浮遊菌濃度，CFU/cm³
    V_{s是含菌粒子沉降速度，cm/s
    F是沉降麵積，}cm^{2
    T是沉降時間，s
（1）浮遊菌的測定（dìng）
浮遊菌的測定可以參照（zhào）國家標準GB/T 16293-2010}《醫藥工業潔淨室（區）浮遊菌的測試方法》（以下簡稱《浮遊菌測試方法》）。重點歸納如下：
①浮遊菌測試是（shì）通過收集懸浮在空氣中的生物性微粒，通過專（zhuān）門的培養基，在適應（yīng）的生長條件下，讓其繁殖到可（kě）見的菌（jun1）落進行計數，從而判定潔淨環境中單位體積空（kōng）氣中（zhōng）菌落數的多少。
②浮（fú）遊菌測定需有專（zhuān）門的采樣器、真空抽氣泵等設備，浮遊菌（jun1）采樣器常用撞擊法中的狹縫式采樣器。
③浮遊菌采樣器必（bì）須要有流量計和定時器（qì），並嚴格按儀器（qì）說明書的要（yào）求定期進行校驗和操作。
④浮遊菌測定的采樣點及數目與懸（xuán）浮粒子測定（dìng）相同，即在同懸粒子測定時相同的測定點采樣。
⑤浮（fú）遊菌（jun1）潔淨度測定的小采樣量和少采樣點（diǎn）數目參見《浮遊菌測試方法》的規定。
⑥浮遊菌潔淨度的結果評定參見（jiàn）《浮遊（yóu）菌測試方法（fǎ）》的規定。
（2）沉降菌的測定
沉降菌（jun1）是用暴露法收集降落在培養皿（mǐn）中的生物性微粒（lì），加以培養繁殖後計數得到的。沉（chén）降菌的測（cè）定可參見國家標準GB/T 16294-2010《醫藥工業潔淨室和潔淨區中沉降菌的測試方（fāng）法》（以下（xià）簡稱《沉降菌測試方法（fǎ）》）。重（chóng）點歸納（nà）如下（xià）：
①沉降菌測定的設備（bèi）主要是90mm*150mm玻璃培養皿和各種培養基。
②沉降（jiàng）菌測定的培養皿應布置在有代表性的地方和氣流擾動小的地方，其少采樣點數（shù）目見下表（biǎo）：

在滿足少（shǎo）測點（diǎn）數的同時，還要滿足少培養皿數（shù），如下表所示。不（bú）論麵（miàn）積大小、作為一個被（bèi）測對象，都應該滿足這個（gè）要求（qiú）。

③采樣方法及培養。將培養（yǎng）皿按要求放置後，打開平皿蓋，使（shǐ）培養（yǎng）基表麵暴露30min後，將平（píng）皿蓋（gài）蓋上，然後在30～35℃的條件下培養48h計數。
④結果計算：M=ΣM_i/n
式中，M為平均菌落數，CFU
      M_i為1,2,3，…，n號（hào）平皿菌落數
      n為平皿（mǐn）總數
（3）物體表麵微生物測試
此測試的目的是（shì）確定（dìng）物體表麵微（wēi）生物汙染的程度。一般有棉簽間接取樣後培養和直接接觸法取樣（yàng）兩種測試方法。
接觸法使用羅達克培養皿，測試方法是將培養皿直接接觸需采樣的（de）物體表麵，培養後長出菌落。這個測試技術適用（yòng）於平整（zhěng）光滑的表（biǎo）麵。
這項測試應在去汙染程序後進行。但瓊脂培養基留在物體表麵上終究是（shì）個問題。因此，采樣後應（yīng）馬上進（jìn）行去汙染。每隻培養皿（mǐn）需做好標誌，指明采樣（yàng）點的確切位置。應注意房間裏的標誌供現在和將來參考。