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生(shēng)物安全櫃的選型及安裝要求

更新時間:2020-04-02  |  點擊(jī)率:6402

一、生物安全櫃的選型及安裝要求(qiú)
1、Ⅰ級生物安全櫃適用於操作樣品不需要進行特殊保護的微生物(wù)操作。
2、Ⅱ級生物安全櫃使用的較為廣泛,其可提供對操作者、實驗(yàn)樣品和環境的綜合性防護,主要用於臨床、診斷、教學和對群(qún)體中出現的(de)與人類嚴重疾病(bìng)有關的廣譜內源性中度風險生物因子(zǐ)進行操(cāo)作的實驗,其中Ⅱ級B1型安全櫃(guì)可用於操作少量揮發性化學試劑和(hé)放射性核素,全排型的II級B2型安全櫃還可以用於以揮發性(xìng)有毒化學品和放射性核素為輔助劑的微生物(wù)實驗(yàn),但是需要注意,II級B2型安全櫃排風量較(jiào)大,在選用時須保證實驗室有足夠的補償送風(fēng),否則會導致實驗室出現較大負壓,並可能導致安全櫃窗(chuāng)口吸入風速過低,引起報警並(bìng)嚴(yán)重降低其生物安全性(xìng),此外,從經濟節能角度來看,II級B2型安全櫃排風量較大,其耗能(néng)要高於II級A型(xíng)安全櫃(guì)。
需要特(tè)別指出的是,Ⅰ、Ⅱ級生物(wù)安全櫃主要是靠操作窗口(kǒu)吸(xī)入的(de)負壓氣流或垂直下降氣流形成的氣流屏障起到(dào)保護人員或操作樣品的作用,但這種由氣流作用形成的局部隔離環境(jìng)並不是安全的。主要體現在以下幾個方(fāng)麵(miàn):
(1)Ⅰ、Ⅱ級(jí)生物安全櫃均靠從操作(zuò)窗口吸入氣流形成負壓氣流屏障,一旦生物安全櫃停止運行或故(gù)障,這種氣(qì)流的隔離作用就不複(fù)存在,若安全櫃處理危(wēi)險度很高的病原(yuán)體(tǐ)或化學物質會存在外逸風險。
(2)對於(yú)在(zài)Ⅰ、Ⅱ級生物安全櫃操作窗口進行(háng)操作的實驗人員應盡量減少手(shǒu)臂(bì)在安全櫃內的大幅度的動作或者頻繁的進出(chū)動作(zuò),這也會擾動安全櫃窗口吸入氣流,削弱安全(quán)櫃的氣流(liú)屏障作用。
(3)對於附著於手或者器具上的病原體,這種氣流隔離作用也會失效。
(4)空(kōng)氣中的氣體成分可以(yǐ)穿透高效過濾(lǜ)器,所(suǒ)以非全排型的(de)Ⅰ、Ⅱ級生物(wù)安全櫃由於有循(xún)環風的存在,並不適合進(jìn)行高濃度的危險氣體物質操(cāo)作(zuò)。

3、Ⅲ級生物安全(quán)櫃可(kě)以高程度的保護操作人員和(hé)外部環境,同時兼顧保護安全櫃內實驗物品。Ⅲ級安全櫃適用於操(cāo)作危險度4級(jí)的病原微生物或感染動物。生物安全櫃是否正確(què)的安放也同樣影響安全櫃的防護性能(néng),理論上應按照實驗(yàn)室操作工藝流程來確定生物安全櫃(guì)的安裝位置。安全櫃的安裝位置一定要注意實驗室內氣流。
(1)生物安全櫃(guì)一般設於實驗室內(nèi)排風口附近,使安全櫃周圍的氣流不致回流到室內潔淨區域。
(2)為了(le)不影響(xiǎng)安全櫃前窗操作口的流入氣流(liú),安全櫃不要(yào)設置在氣流激烈變化和人走動多的地方,在進行安全櫃實際現場檢測時,仍(réng)然發現個別安全櫃由於實驗室空間的限製(zhì)安裝(zhuāng)在實驗室送風(fēng)口下麵,送風氣流影響安(ān)全櫃前窗操作口的(de)流入氣流甚至有破壞前窗(chuāng)操作口氣流(liú)的屏障作用而導致安全櫃操作台麵潔淨度不合格的情況(kuàng)發生。
(3)如果實驗室有窗戶,應時刻處於關閉狀態。
(4)考慮到生物安全櫃的日(rì)常清潔、維修方便或進行電氣安全測試,在空間允許(xǔ)條件下安全櫃周圍應至(zhì)少預留300mm的(de)距離。
Ⅰ級及ⅡA型安全櫃設計的(de)外排氣流通常返回實驗室而不必向外部(bù)排風,室內循環方式的優點在於安全(quán)櫃容易安置、減少空(kōng)調係統負荷、安全(quán)櫃(guì)的啟停對對實驗室(shì)內(nèi)氣流的(de)影響也較小,且不用接外排風管也便於室內設備的(de)移動,但是在操作化學物質時應外接排風管道(dào)向室外排風。因此,生物安全櫃的排風(fēng)管道設置方式(shì)根據使用要求可分為密閉式和開放式兩種。
①密閉式即用密閉管道連接的(de)方式將安全櫃的排風全部排入排風管(guǎn)道。
②開放式是(shì)排風管道和安全櫃排風口之間采用非(fēi)密閉連接形式,這種方式排風管道的排風量遠大於安全櫃的排風,使安全櫃和(hé)室內同時向外排風,並且由於采用非密閉式連接,安全櫃的(de)啟停(tíng)對排風管道內總的排風量影響不大,所以對室(shì)內氣流狀態影響也不大。
③ⅡB型安全櫃的排風須采用密閉式連接方式,不允許向實驗室內排風(fēng)。
④當實驗室內安全(quán)櫃采(cǎi)用(yòng)密閉式連接方式向排風管道內排風時,通風空(kōng)調係統和自控係統的設計應考慮(lǜ)安全櫃排風引起的變風量影響。
二、生物安全櫃的現(xiàn)場性能驗證
1、生物安全(quán)櫃在運輸過程中可能引起易損部件損壞,如高效過濾器在運輸、安裝等過程中極易受到損壞。
2、長期動力通風及頻繁消毒也會導致(zhì)高效過濾器發生泄漏,故需要對高效過濾器進行安裝後的完整性(xìng)測試,即安裝後的現場原位檢漏(lòu)測試。
3、對於全排型的Ⅲ級生物安全櫃、II級B2型生物安全櫃,一般都需要(yào)和實驗室空調係統相匹配,尤其II級B2型生物安全櫃排風量很大,對實驗室的風量平衡影響很大,這都需要和空調係統進行(háng)整體的現場調試(shì)才能滿(mǎn)足安全櫃的運行要求。
4、生物安全櫃雖然在(zài)出廠(chǎng)前已進行出廠合格檢(jiǎn)驗,但從實際現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)情況來看,具體(tǐ)到每一台生物安全櫃,其送/排風的平衡、垂直氣流流速、窗口進風氣流(liú)流速、手套口風速、氣(qì)流流向等往往都需(xū)要在現場進行調試才能滿足要求。
現場檢(jiǎn)測(cè)性(xìng)能參數主要(yào)包(bāo)括:垂直下降(jiàng)氣流風速、窗口進風氣流(liú)流速、潔(jié)淨度、噪聲、照度、送(sòng)風高效過濾器檢漏、排風高效過濾器檢漏、安裝距離、氣流(liú)模式、Ⅲ級生物安全櫃運行時與實驗室間的負壓、手套口(kǒu)風速(sù)、Ⅲ級生物安(ān)全櫃箱體嚴密性測(cè)試等。
(1)噪聲(shēng):生物安全櫃噪聲超(chāo)標情(qíng)況比較普遍,國產(chǎn)或進口生物安全櫃都普遍存在這一狀況,其中一部分是由於安全櫃風速過大導致、一(yī)部分是(shì)安全櫃風機本身噪聲過大導致,且II級B2型安全櫃噪聲超(chāo)標情況要(yào)高於II級A2型安全櫃,雖然(rán)噪聲(shēng)對(duì)生物安全沒有直接影響,但對(duì)實驗操作人員為有一定(dìng)幹(gàn)擾(rǎo),主要影響實驗操(cāo)作(zuò)人員舒適性。
(2)照度:生物安全櫃照度(dù)不足情況並不多,工(gōng)作(zuò)台麵照度(dù)不足(zú)會影響操作人員(yuán)的舒適(shì)性(xìng),同時也影(yǐng)響操作人員操作準(zhǔn)確性。
(3)潔淨度:即(jí)安全櫃(guì)操作麵的含塵(chén)濃度,潔淨(jìng)度不合格會導致操作材料的汙染,進而(ér)影響實驗結果準確性,潔淨度不合格往往是由這幾個方麵導致:送風高效過濾器老化破損、高效過濾器運輸或安裝過程中損(sǔn)壞、高效過濾器邊框安裝不嚴存在泄漏(lòu)、生(shēng)物安全櫃垂(chuí)直氣流流速過小不能充分淨化工作(zuò)區、生物安全櫃(guì)窗口進風氣流過大或實驗室送風(fēng)口設(shè)置在生物安全櫃上方,導致實驗室內未淨化氣流穿越生(shēng)物安全櫃工作區。
(4)送(sòng)風高效(xiào)過濾器原位檢漏:送風(fēng)高效過濾(lǜ)器是維持生物安(ān)全櫃潔淨(jìng)度的關鍵部件,若過濾器出現損壞或過濾器(qì)安(ān)裝不嚴均可能導致操作工作麵潔淨度(dù)不合格,進而導致操作材料的汙染,影響實驗結果準確性,實際檢測中送風高效過濾器均有損壞或邊框安裝不嚴的情況出(chū)現。
(5)垂直下降氣流流速,實驗樣品的安全性主要通(tōng)過垂(chuí)直下(xià)降氣流來保證,相關標準中要求0.2~0.4m/s,如果過低則達不到(dào)帶走(zǒu)操作過程中產生的生物氣溶膠(jiāo)的作用,同時在進行實驗操作時對汙染的抗幹(gàn)擾性會較差,甚至發(fā)生實驗材料(liào)間的交叉汙染(rǎn),過大(dà)可能會引起安全櫃內氣流外(wài)逸。相關標準中在規定垂直下降氣(qì)流風速的同時,也規定了垂直下降氣流(liú)的不均勻度,要(yào)求各測點氣流(liú)流速與平均風速(sù)間偏差不超過(guò)±20%或0.08m/s,氣流的不均勻度過大會減弱安全櫃防止實驗(yàn)樣品間交叉汙染的能力(lì),此外氣流不均勻(yún)度過大(dà)也可能導致安全櫃內局部產(chǎn)生氣流(liú)渦流。
(6)氣流模式,通過發(fā)煙法可以直觀的看到生物安全櫃的(de)氣流流向,即(jí)使安全櫃氣流流速滿足要求,仍可能出現由於結構(gòu)設(shè)計不合理或流速(sù)不均衡導(dǎo)致氣流模式不符合要(yào)求的情況出現,如操作窗口氣流外逸(yì)或有氣流穿越(yuè)工作區等。
(7)窗(chuāng)口進風氣流流速,生物安全櫃對操作人員的保護主要是通過從前窗吸入氣流形成負壓防止安全櫃內氣(qì)流外逸(yì)來實現的,相關標準中(zhōng)要求不低於0.4m/s或0.5m/s,如果過低可能導致安全櫃操作時產生的危險氣溶膠外逸(yì),進(jìn)而對操作人員和(hé)實驗室環境產生危害,過大則會導致實驗室內未淨化氣流(liú)穿越安全櫃工(gōng)作區,引起操作材料被汙染的風險(xiǎn)。
(8)排風高效過濾器原位檢漏,排風高效過濾器(qì)是生物安全的重要保障,也是生物安全櫃形成一級隔(gé)離屏障的重要組成部分,在(zài)各個(gè)安全櫃相關(guān)標準中(zhōng)都明確規定生物安全櫃的排風(fēng)必須(xū)經過排風高效過濾器過濾後才能排放到(dào)環境中。如果排風高效過濾器出現泄漏(lòu)可導致(zhì)生物危險因子外逸到實(shí)驗室或室外環境(jìng)中,進而(ér)對操作人員和環境產生危害。和送風高效過濾器的情況相同,在實際檢測過程中(zhōng)也有過濾器破損(sǔn)或邊框安裝不嚴的情況出現。
(9)Ⅲ級生物安全櫃箱體嚴密(mì)性,櫃體嚴密性是Ⅲ級生物安全櫃物理隔離的重要組成部分,也是現場檢測(cè)的重要指標。Ⅲ級生物安全櫃在正常運行時處於負壓運行狀態,一般不(bú)會(huì)出現危險生物氣溶膠的外逸,但是安全櫃或排風係統如果突然故障導致停機,這種(zhǒng)負壓作用形成的屏障作用將會消(xiāo)失,而良好的櫃體(tǐ)氣密性可以保證突發狀況下的物理隔離,很大程(chéng)度的防(fáng)止(zhǐ)危險生物氣溶膠外逸。目前,櫃體(tǐ)氣密(mì)性的現場檢測方法通(tōng)常(cháng)采用(yòng)壓力衰減法。
(10)Ⅲ級生物安全櫃運行時櫃體內負壓,Ⅲ級生物安全櫃由於用於操作(zuò)危險度4級的微生物或實驗動(dòng)物,所以其安全(quán)防護的要求是非常嚴(yán)格的,正常工作時(shí)內部負壓值要求不(bú)低於-120Pa,負壓運行實質(zhì)是對櫃體形成的物理防護的雙重保障,負壓運行可進一步保證出現意外狀況,如手套破損(sǔn)或櫃體有微小泄漏時,生物氣溶膠不發生外逸。
(11)Ⅲ級生物安全(quán)櫃手套(tào)口氣流流速,由於(yú)Ⅲ級生(shēng)物安(ān)全櫃主要操作致命生(shēng)物因子的生物實驗,所以生物安全是其主(zhǔ)要考慮的關鍵問題,Ⅲ級生物安全櫃是一個負壓密閉箱體,主要通過前麵的橡膠手套口進行操作,在操作過(guò)程中可能出現手套意外破損或手套脫落的突發狀況,在發生意(yì)外狀況時操作口仍須保證一定的流入氣流流速,這樣可以防止危險生物(wù)氣溶膠的外逸。
生(shēng)物安全櫃的現場檢測屬於靜態性(xìng)能驗證,實際使用過程中還需要進(jìn)行關(guān)鍵性能參數的連續(xù)監測,如高效過濾器阻力監測及(jí)報警、垂直下(xià)降氣流和窗口進風氣流流速監測及報警、前窗打開位置報警(jǐng)等。
三、生物(wù)安全櫃的(de)使用及注意事項
1、生物安全櫃啟動前的(de)準備工作(zuò)
(1)實驗操作者應提前佩戴(dài)好個人防護裝備。
(2)安全櫃開啟前用75%的酒精或其它消毒劑(jì)全麵擦試安全櫃內的操作台麵(miàn)和其它平麵。
(3)打開前操作窗至規定高度後開(kāi)啟生物安全櫃,開啟後要運行一(yī)段時間,以保證安全櫃氣流穩定,並將工作區空(kōng)氣中的汙染物*清除。
(4)實驗開始前應(yīng)將本次實(shí)驗(yàn)需要的所有物品擦拭幹淨後(hòu)提前放入安全櫃內,以避免在實驗過程中頻繁拿取(qǔ)物品造成(chéng)安全櫃氣流(liú)波動。
(5)安全櫃內不放(fàng)與本次(cì)實(shí)驗無關的物品(pǐn),櫃內物(wù)品(pǐn)擺放應做到清潔區、半汙染區與(yǔ)汙染區基本分開,操作(zuò)過程中物品取用方便,且三區之(zhī)間無交(jiāo)叉,物品應盡量靠後放置,但不得擋住回風格柵。
2、實驗操作應規範
(1)正(zhèng)確運用微生(shēng)物學實驗技(jì)術。
(2)操作期間如果需要取出(chū)或移入物品,應盡量緩慢地移出或移入手臂,盡量減小空氣的攪動,從而避免(miǎn)因手臂的移動破壞安全櫃氣流而導致危險氣溶膠的逸出。
(3)櫃內移動物品時應盡量避免交叉汙染,需按照低汙染物(wù)品向高汙染物品移動的原則,應避免高汙染物品在移動過程中對櫃內產生大麵積的(de)汙染。
(4)在實驗操作時,不可打開玻璃視窗,應保證操作者臉部在工作窗口之上;在安全櫃中應盡量避免使用產生振動的設備,如使用此類設備,如離心機、攪(jiǎo)拌器等,應將此設備(bèi)放在安(ān)全櫃的裏側,並在運(yùn)行時停止其它的實(shí)驗(yàn)操作。
(5)通常(cháng)來說,在(zài)安(ān)全(quán)櫃內不應使用點火裝置(zhì),由(yóu)於火焰產生(shēng)的上升熱氣流會影響用以保護櫃內物品的垂直下降氣流,火焰還(hái)會產生氣流擾動,進而增加交叉汙染的(de)風險。
(6)任何灑濺在櫃內的東西都應立即清除幹淨,並放在的(de)垃圾袋中。
(7)在安全櫃工作(zuò)時盡量減少背後人員走動(dòng)以及快速開關實驗室房門,以防止幹擾安全櫃內氣流;如(rú)果在正常狀態下,安全櫃報警,則應立即停止櫃內的一切工(gōng)作(zuò),並對報警進行檢查,在查明原因並解決問題前不應再使用此安全櫃。
3、實驗操作完成應妥善關閉安全櫃(guì)
(1)將(jiāng)所(suǒ)有的物品取出(chū),並用75%的(de)灑精(jīng)擦(cā)拭(shì)櫃內各麵,關閉安全櫃前再運行一段時間,以便將工作區操作過程中產(chǎn)生的微生物氣溶膠排出,同時開啟紫外線照射至少半小(xiǎo)時以上。
(2)妥善處理所有實驗過程中產生的廢棄物,如有必要,將所有害生物廢料進行高壓消毒。

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